تیزاب نکالنے کا مطلب ہے کہ مخصوص حالات میں کولیجن نکالنے کے لیے تیزابی محلول کا ایک خاص ارتکاز استعمال کرنا ہے، بنیادی طور پر کم آئن ارتکاز والی تیزابی حالات کا استعمال بین سالماتی نمک کے بندھنوں اور شِف اڈوں کو تباہ کرنے کے لیے، اور فائبر کی سوجن اور تحلیل کا سبب بنتا ہے۔ ایسڈ طریقہ سے نکالا جانے والا کولیجن عام طور پر تیزاب میں گھلنشیل کولیجن بن جاتا ہے۔ تیزاب کو تحلیل کرنے کا طریقہ کولیجن کے مالیکیولز کو کراس لنک کیے بغیر تحلیل کر سکتا ہے اور کولیجن ریشوں کو بھی تحلیل کر سکتا ہے جس میں الڈیمین کراس لنکنگ بانڈز شامل ہیں، اور پھر انہیں سالوینٹ میں چھوڑ سکتے ہیں۔ کولیجن نکالنے کے لیے تیزاب کا طریقہ نسبتاً عام اور موثر طریقہ ہے۔ کم درجہ حرارت کے تیزاب طریقہ سے نکالا جانے والا کولیجن اپنی ٹرپل ہیلکس ساخت کو زیادہ سے زیادہ برقرار رکھتا ہے اور طبی حیاتیاتی مواد اور خام مال کی تیاری کے لیے موزوں ہے۔ عام عمل یہ ہے کہ پہلے سے تیار شدہ ہڈیوں کے کھانے میں تیزابی محلول کا ایک خاص مواد سے مائع تناسب کے مطابق شامل کیا جائے اور ایک خاص مدت کے لیے 0-25 ڈگری پر ہلائیں اور نکالیں۔ کولیجن نکالنے کے لیے تیزاب کا طریقہ استعمال کرتے وقت، یہ خیال رکھنا چاہیے کہ نکالنے کا درجہ حرارت بہت زیادہ نہیں ہونا چاہیے، تاکہ کولیجن کی حیاتیاتی سرگرمی کی تباہی سے بچا جا سکے۔ نمونے لینے اور پری ٹریٹمنٹ کے بعد، ہوموجنیٹ کو کم درجہ حرارت پر تیزاب کے ساتھ نکالا گیا اور تیزاب میں گھلنشیل کولیجن (ASC) حاصل کرنے کے لیے سینٹرفیوج کیا گیا۔ سالوینٹس کے طور پر استعمال ہونے والے تیزاب میں بنیادی طور پر ہائیڈروکلورک ایسڈ، فاسفورک ایسڈ، فارمک ایسڈ، ایسٹک ایسڈ، مالیک ایسڈ، سائٹرک ایسڈ وغیرہ شامل ہیں، لیکن زیادہ تر مطالعات ایسٹک ایسڈ نکالنے پر مرکوز ہیں۔ مثال کے طور پر، ماریا سادووسکا وغیرہ۔ کمرے کے درجہ حرارت پر پروٹین کو کولیجن نکالنے کے لیے 0.5mol/L سائٹرک ایسڈ کا استعمال کیا جاتا ہے، اس کے نکالنے کی شرح ایسٹک ایسڈ نکالنے سے قدرے کم ہے۔ سائٹرک ایسڈ کو کھانے کی صنعت میں کولیجن نکالنے میں بڑے پیمانے پر استعمال کیا جاتا ہے کیونکہ یہ رنگ اور بدبو پیدا نہیں کرتا ہے۔
تیزاب کے علاج کے دوران، ردعمل مضبوط ہے، ہائیڈرولیسس مکمل ہے، اور امینو ایسڈ مرکب زیادہ تر پیدا ہوتا ہے. تیزاب نکالنے کا استعمال کرتے وقت، تیزاب کی حراستی، ہائیڈرولیسس درجہ حرارت، ہائیڈولیسس کے وقت اور دیگر حالات پر منحصر ہے، ناہموار مالیکیولر وزن کے ساتھ کولیجن ہائیڈرولائزیٹ حاصل کیا جا سکتا ہے۔ تاہم، ٹرپٹوفن کو تباہ کر دیا جائے گا، سیرین اور ٹائروسین بھی جزوی طور پر تباہ ہو جائیں گے، اور تیزاب کے معتدل ارتکاز کے مکمل ہائیڈرولیسس کے دوران آلات کو سنجیدگی سے خراب کر دیا جائے گا۔ لہذا، تیزابیت، درجہ حرارت، وقت، اور دیگر متاثر کن عوامل کو تیزابی طریقہ سے بائیو میڈیکل کولیجن کی تحلیل کے لیے درست طریقے سے کنٹرول کیا جانا چاہیے۔ مختلف کمیوں کی وجہ سے، تیزاب کا طریقہ شاذ و نادر ہی اکیلے استعمال ہوتا ہے، اور عام طور پر انزیمیٹک طریقہ کے ساتھ ملایا جاتا ہے۔ مثال کے طور پر، سور کی جلد کو خام مال کے طور پر استعمال کرتے ہوئے، کولیجن کو سائٹرک ایسڈ (pH8.6) اور پیپسن کی ہم آہنگی کے تحت نکالا جاتا ہے۔ شامل کریں 0۔{8}}5moL/L سائٹرک ایسڈ محلول (pH 2.5-3) پیپسن پر مشتمل ایک مدت کے لیے علاج شدہ سور کی جلد پر، اور پھر NaCl کے ساتھ نمکین کریں، آخری نکالنے کی شرح 12.35 فیصد ہے، اور اقتباس تین کناروں کو برقرار رکھتا ہے قسم I کولیجن کی ہیلیکل ساخت۔ دوسروں نے چِک سٹرنل کارٹلیج کو خام مال کے طور پر استعمال کیا، 0.5moL/L ایسیٹک ایسڈ کی حالت میں متعدد بار پیپسن کے ساتھ ہضم کیا گیا، 4 ڈگری اور 20000r پر 20 منٹ کے لیے سینٹری فیوج کیا گیا، اور آخر میں آئن ایکسچینج کے لیے DEAE-Sephadex A-50 لگایا گیا۔ کرومیٹوگرافی، اور پھر ڈائیلائز کیا گیا، اور پھر NaCl کے ساتھ نمکین کیا گیا، اور آخر میں پیوریفائیڈ کولیجن ٹائپ II حاصل کیا گیا۔
